Utilizzare strumenti di carotaggio sterili e monouso e una catena di custodia approvata dal laboratorio. Campionare il pane d'api prelevando un campione dal centro di 5-10 celle su più telai e, idealmente, su più colonie o unità di campionamento definite. Mantenere i campioni per i test fungini refrigerati ma non congelati, a meno che il laboratorio diagnostico non specifichi diversamente; dividere i campioni prima della conservazione poiché i laboratori per i residui di pesticidi potrebbero richiedere la conservazione in congelatore. Etichettare ogni campione con informazioni complete su apiario, colonia, trattamento, data e posizione del telaio, quindi spedirlo rapidamente al laboratorio appropriato.
Il campionamento rappresentativo e la corretta conservazione contano tanto quanto il metodo di laboratorio. Utilizzare strumenti puliti, evitare la contaminazione da cera, separare le porzioni per i test fungini e sui pesticidi e confermare i requisiti di imballaggio e temperatura con ciascun laboratorio prima della raccolta.
Come raccogliere campioni rappresentativi di pane d'api
Campionare il centro delle singole celle
Inserire una punta di pipetta in polietilene sterile, uno strumento di carotaggio monouso o una cannuccia di campionamento pulita direttamente al centro di una cella di pane d'api. Questo aiuta a ottenere il materiale target riducendo il contatto con la cera d'api, il miele e i detriti circostanti.
Rimuovere e conservare il campione all'interno della punta di campionamento o della cannuccia ogni volta che è possibile. Evitare di raschiare la superficie del favo, il che può introdurre frammenti di cera e altri contaminanti.
Utilizzare più celle e telai
Raccogliere un campione per cella da circa 5–10 celle. Distribuire le celle su diversi telai all'interno della colonia invece di prelevare tutto il materiale da un'unica posizione comoda.
Per le indagini commerciali, definire l'unità di campionamento in anticipo. A seconda dell'obiettivo, questa può essere una colonia, un apiario o un insieme di colonie dallo stesso sito.
Preservare la struttura del campione
Utilizzare telai standard o aree del telaio chiaramente definite quando si confrontano colonie, posizioni o fornitori. Aree di campionamento coerenti migliorano la comparabilità tra siti geografici e lotti di produzione.
Non schiacciare o miscelare inutilmente i campioni sul campo. Mantenere il materiale contenuto nel suo dispositivo di campionamento originale o in un contenitore pulito e approvato dal laboratorio finché il laboratorio non conferma se è necessaria l'omogeneizzazione.
Quali strumenti sono appropriati?
Strumenti di carotaggio sterili monouso
Gli strumenti da campo preferiti sono punte di pipetta sterili preconfezionate, punte in polietilene sterili o cannucce di campionamento monouso che si adattano alle dimensioni della cella. Questi strumenti riducono la contaminazione incrociata tra le colonie ed evitano la variabilità di pulizia associata alle attrezzature riutilizzabili.
Utilizzare uno strumento nuovo per ogni cella quando possibile e, come minimo, utilizzare strumenti nuovi tra colonie, apiari e gruppi di trattamento. Mantenere gli strumenti inutilizzati sigillati fino alla raccolta.
Attrezzatura di campionamento manuale pulita
I carotatori manuali specializzati possono rimuovere il polline fermentato con precisione limitando i danni al favo circostante. Questo è utile quando la struttura in cera deve rimanere intatta o quando il campione deve contenere meno cera d'api possibile.
Se si utilizzano strumenti riutilizzabili, è necessaria una procedura di pulizia e decontaminazione convalidata. Non fare affidamento solo sulla pulizia visiva per lavori sui residui o microbiologici.
Attrezzatura da campo di supporto
Preparare guanti puliti, pinze se necessario, sacchetti antimanomissione, etichette impermeabili, un pennarello indelebile, un registro dei campioni e un refrigeratore con siberini. Mantenere i siberini separati dai campioni in modo che i contenitori non si bagnino o si danneggino.
Utilizzare strumenti e imballaggi separati per diverse cronologie di trattamento. Questo è particolarmente importante quando si confrontano colonie trattate e non trattate.
Come devono essere etichettati i campioni?
Registrare l'apiario e la colonia
Ogni contenitore dovrebbe identificare il sito dell'apiario, la data di raccolta, il numero di identificazione della colonia e la cronologia del trattamento. Includere il contatto dell'apicoltore o dell'operatore e il test richiesto quando il laboratorio lo richiede.
Un identificatore codificato è utile per i grandi programmi commerciali, ma la chiave del codice deve essere conservata in modo sicuro e collegata ai registri di campo.
Registrare la posizione del telaio
Documentare il numero o la posizione del telaio, il lato del telaio e l'area approssimativa della cella. Annotare se il materiale è stato prelevato dalla regione superiore, centrale o inferiore del telaio se la posizione può influenzare l'interpretazione.
Registrare il numero di celle campionate e se il campione è un campione di singola cella o un campione di colonia aggregato.
Mantenere i registri della catena di custodia
Registrare il raccoglitore, l'ora di raccolta, l'ora di imballaggio, il metodo di spedizione e le informazioni di ricezione del laboratorio. Per le indagini sui pesticidi regolamentate, utilizzare imballaggi antimanomissione e qualsiasi modulo di catena di custodia richiesto dal laboratorio.
Le fotografie dei telai campionati possono fornire utili prove di supporto, in particolare per i programmi multi-sito o di qualità dei fornitori.
Come devono essere imballati e trasportati i campioni?
Il test fungino richiede materiale vitale
I campioni destinati al conteggio delle colonie fungine o all'analisi basata su coltura generalmente non dovrebbero essere congelati a meno che il laboratorio diagnostico non istruisca specificamente di farlo. Il congelamento può ridurre la vitalità di alcuni funghi e alterare il profilo microbico, il che può influenzare il conteggio e l'interpretazione.
Mantenere questi campioni freschi, protetti dal calore e dalla luce solare diretta, e spedirli tramite un servizio notturno direttamente al laboratorio diagnostico. Confermare l'intervallo di temperatura accettabile del laboratorio e il tempo di transito massimo prima del campionamento.
I campioni di residui di pesticidi seguono i requisiti di laboratorio
I residui di pesticidi sono analiti chimici, quindi il requisito di conservazione può differire dai test fungini. Molti laboratori di analisi richiedono un rapido raffreddamento o congelamento per limitare la degradazione, ma la condizione corretta dipende dai composti target, dal contenitore e dal metodo convalidato.
Non applicare automaticamente la regola del "non congelare" dei test fungini ai campioni di pesticidi. Chiedere al laboratorio dei residui le istruzioni scritte e raccogliere una porzione separata quando i due test hanno requisiti di conservazione diversi.
Utilizzare contenitori compatibili
Avvolgere i campioni in fogli di alluminio puliti o inserirli in sacchetti o contenitori di plastica approvati dal laboratorio quando indicato dal laboratorio ricevente. L'imballaggio deve essere pulito, sigillabile e resistente alle perdite.
Per i test sui pesticidi, utilizzare contenitori e rivestimenti che non introducano composti target o interferiscano con l'estrazione. Evitare imballaggi domestici, sacchetti riutilizzati, materiali stampati e contenitori che potrebbero contenere residui chimici a meno che il laboratorio non li abbia approvati.
In che modo differiscono i due programmi di test?
Conteggio delle colonie fungine
L'obiettivo è preservare organismi fungini vivi o recuperabili per coltura o conteggio. Il campionamento deve quindi ridurre al minimo l'esposizione al calore, il ritardo, l'essiccazione e il congelamento inappropriato.
Il laboratorio dovrebbe ricevere un campione rappresentativo e non contaminato con una chiara registrazione delle sue condizioni di raccolta e trasporto.
Analisi dei residui di pesticidi
L'obiettivo è misurare i residui chimici su una matrice analitica definita. Il campione dovrebbe contenere la minor quantità possibile di cera d'api estranea, sporcizia, miele e contaminazione da manipolazione, poiché questi materiali possono influenzare l'estrazione e gli effetti della matrice.
Il test dei residui può richiedere una massa maggiore, un campione aggregato, il trasporto congelato o un contenitore specifico. Questi dettagli devono provenire dal laboratorio di analisi piuttosto che essere dedotti dalle procedure di test fungino.
Dividere i campioni prima della conservazione
Quando sono richieste entrambe le analisi, raccogliere materiale sufficiente per creare porzioni separate per test fungini e pesticidi. Etichettare ogni porzione con lo stesso codice del campione principale e identificare il test previsto.
La divisione al momento della raccolta impedisce che un metodo di conservazione adatto a un'analisi comprometta l'altra.
Comprendere i compromessi
Campionamento rappresentativo rispetto al disturbo dell'alveare
Prelevare campioni da più telai migliora la rappresentatività ma aumenta il tempo di manipolazione e il disturbo alla colonia. Utilizzare un piano di campionamento predefinito in modo che gli operatori raccolgano materiale comparabile senza manipolazioni inutili.
Purezza del campione rispetto alla quantità del campione
Ridurre al minimo la cera migliora la purezza dei test chimici, ma campioni molto piccoli potrebbero non fornire materiale sufficiente per tutte le analisi richieste. Confermare la massa minima del campione del laboratorio prima del lavoro sul campo e aumentare il numero di celle campionate quando necessario.
Velocità rispetto al costo logistico
La consegna notturna e il raffreddamento controllato aumentano i costi di spedizione, ma un transito prolungato può compromettere la vitalità fungina e ridurre la fiducia nel risultato. Per le operazioni commerciali, kit standardizzati e spedizioni di laboratorio programmate possono migliorare i tempi di risposta e l'evasione degli ordini.
Campioni aggregati rispetto a campioni individuali
L'aggregazione può ridurre i costi analitici e descrivere una condizione a livello di apiario, ma può nascondere la variazione tra le colonie. Mantenere i campioni delle singole colonie quando contano la cronologia del trattamento, lo stato della malattia, la geografia o la tracciabilità normativa.
Il congelamento come regola generale di conservazione
Il congelamento non è universalmente corretto o errato. Può danneggiare la validità dei test fungini basati su coltura, pur essendo appropriato per alcuni metodi di analisi dei residui di pesticidi, quindi la conservazione deve essere abbinata alla procedura convalidata dal laboratorio.
Insidie comuni da evitare
Utilizzare lo stesso strumento tra i campioni
Uno strumento riutilizzabile o condiviso può trasferire funghi, cera, polline o residui di pesticidi tra le colonie. Utilizzare strumenti monouso sterili o un processo di pulizia convalidato tra ogni unità di campionamento definita.
Campionare solo le celle più facili
Il campionamento di convenienza da un telaio o da una chiazza visibile potrebbe non rappresentare la colonia. Seguire un piano basato sulla posizione che copra più telai e registri le coordinate campionate.
Combinare test incompatibili in un unico contenitore
Un singolo contenitore potrebbe non essere adatto sia per l'analisi microbiologica che per quella chimica. Confermare i requisiti per ogni test e dividere la raccolta in porzioni etichettate separatamente.
Spedire senza conferma del laboratorio
I laboratori differiscono per quantità minima, tipo di contenitore, requisiti di raffreddamento e tempo di transito accettabile. Ottenere le loro istruzioni prima della raccolta, specialmente quando il test fa parte di un programma di qualità commerciale, normativo o di verifica dei fornitori.
Come applicarlo al tuo programma di campionamento
Selezionare strumenti, contenitori, quantità di campioni e condizioni di spedizione con i laboratori riceventi prima di visitare l'apiario.
- Se il tuo obiettivo principale è il conteggio fungino: Utilizzare strumenti di carotaggio monouso sterili, raccogliere campioni da 5-10 celle su più telai, mantenere i campioni freschi ma non congelati a meno che non sia indicato diversamente e spedirli durante la notte.
- Se il tuo obiettivo principale è l'analisi dei residui di pesticidi: Ridurre al minimo la contaminazione da cera d'api, raccogliere materiale sufficiente per il metodo del laboratorio e seguire i suoi requisiti scritti per contenitore, raffreddamento o congelamento.
- Se il tuo obiettivo principale sono entrambi i test: Raccogliere abbastanza pane d'api da dividere in porzioni separate per funghi e pesticidi presso l'apiario, quindi conservare e spedire ogni porzione secondo il suo protocollo di laboratorio specifico.
- Se il tuo obiettivo principale è la tracciabilità commerciale: Utilizzare etichette codificate, coordinate del telaio, registri dei trattamenti, imballaggi antimanomissione e una catena di custodia documentata per ogni colonia e spedizione.
- Se il tuo obiettivo principale è un approvvigionamento efficiente multi-sito: Standardizzare strumenti, aree del telaio, moduli di raccolta e programmi di corriere in modo che i campioni di diversi apiari possano essere confrontati ed elaborati in modo coerente.
Un risultato sul pane d'api difendibile inizia con un campione rappresentativo, uno strumento non contaminato e condizioni di conservazione abbinate al test.
Tabella riassuntiva:
| Aspetto | Test Fungino | Test sui Residui di Pesticidi |
|---|---|---|
| Obiettivo Primario | Preservare organismi fungini vivi per coltura | Misurare accuratamente i residui chimici |
| Conservazione | Mantenere fresco, non congelato (salvo specifica) | Seguire le istruzioni del laboratorio; potrebbe richiedere il congelamento |
| Gestione del Campione | Ridurre al minimo calore, ritardo, essiccazione | Ridurre al minimo cera e contaminazione |
| Contenitore | Pulito, sigillabile, approvato dal laboratorio | Contenitore approvato per l'analisi dei residui |
| Quantità del Campione | Confermare la massa minima; potrebbero servire più celle | Solitamente richiesta una massa maggiore |
| Spedizione | Notturna, fresco | Come da istruzioni del laboratorio |
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